Javascript ayeuna ditumpurkeun dina panyungsi anjeun.Nalika JavaScript ditumpurkeun, sababaraha pungsi ramatloka ieu moal jalan.
Javier Fidalgo, * Pierre-Antoine Deglesne, * Rodrigo Arroyo, * Lilian Sepúlveda, * Evgeniya Ranneva, Philippe Deprez Departemen Élmu, Skin Tech Pharma Group, Castello D'Empúries, Catalonia, Spanyol * Pangarang ieu gaduh sababaraha wawasan ngeunaan karya ieu Sarua. kasang tukang kontribusi: Asam hyaluronic (HA) mangrupakeun polisakarida alami dipaké dina produksi fillers dermal pikeun tujuan estetika.Kusabab éta gaduh satengah umur sababaraha dinten dina jaringan manusa, pangisi dermal dumasar-HA dirobih sacara kimia pikeun manjangkeun umurna dina awak.Modifikasi nu paling umum dina fillers basis HA komérsial nyaéta pamakéan 1,4-butanediol diglycidyl éter (BDDE) salaku agén crosslinking pikeun crosslinks ranté HA.BDDE sésa atawa unreacted dianggap non-toksik dina <2 bagian per juta (ppm);kituna, BDDE residual dina filler dermal final kudu diitung pikeun mastikeun kaamanan sabar.Bahan jeung métode: Ulikan ieu ngajéntrékeun deteksi jeung karakterisasi produk samping tina réaksi cross-linking antara BDDE jeung HA dina kaayaan basa ku ngagabungkeun kromatografi cair jeung spéktrometri massa (LC-MS).Hasilna: Saatos analisa anu béda-béda, kapanggih yén kaayaan basa sareng suhu luhur anu dianggo pikeun ngabasmi hidrogél HA-BDDE ngamajukeun formasi produk sampingan anyar ieu, sanyawa "kawas propiléna glikol".Analisis LC-MS dikonfirmasi yén produk samping boga massa monoisotopic sarua jeung BDDE, waktu ingetan béda (tR), sarta modus absorbance UV béda (λ=200 nm).Beda sareng BDDE, dititénan dina analisa LC-MS yén dina kaayaan pangukuran anu sami, produk sampingan ieu ngagaduhan tingkat deteksi anu langkung luhur dina 200 nm.Kacindekan: Hasil ieu nunjukkeun yén teu aya époksida dina struktur sanyawa anyar ieu.Diskusi dibuka pikeun meunteun résiko produk sampingan anyar ieu anu aya dina produksi hidrogel HA-BDDE (pangisi dermal HA) pikeun tujuan komérsial.Konci: asam hyaluronic, HA dermal filler, cross-numbu asam hyaluronic, BDDE, LC-MS analisis, BDDE ku-produk.
Pangisi dumasar kana asam hyaluronic (HA) mangrupikeun pangisi dermal anu paling umum sareng populér dianggo pikeun tujuan kosmetik.1 Pangisi dermal ieu mangrupikeun hidrogél, biasana diwangun ku > 95% cai sareng 0,5-3% HA, anu masihan aranjeunna struktur sapertos gél.2 HA nyaéta polisakarida jeung komponén utama matriks ekstrasélular vertebrata.Salah sahiji bahan.Ieu diwangun ku (1,4)-asam glukuronat-β (1,3)-N-acetylglucosamine (GlcNAc) unit disakarida ulangan disambungkeun ku beungkeut glikosida.Pola disakarida ieu sami dina sadaya organisme.Dibandingkeun sareng sababaraha pangisi dumasar protéin (sapertos kolagén), sipat ieu ngajadikeun HA molekul anu biokompatibel pisan.Pangisi ieu tiasa nunjukkeun spésifisitas runtuyan asam amino anu tiasa dikenal ku sistem imun pasien.
Nalika dianggo salaku pangisi dermal, watesan utama HA nyaéta pergantian gancangna dina jaringan kusabab ayana kulawarga énzim khusus anu disebut hyaluronidases.Sajauh ieu, sababaraha modifikasi kimiawi dina struktur HA geus dijelaskeun pikeun ngaronjatkeun satengah-hirup HA dina jaringan.3 Seuseueurna modifikasi ieu nyobian ngirangan aksés hyaluronidase kana polimér polisakarida ku cara ngaitkeun silang ranté HA.Ku alatan éta, alatan kabentukna sasak jeung beungkeut kovalén antarmolekul antara struktur HA jeung agén cross-linking, cross-linking hydrogel HA ngahasilkeun leuwih produk degradasi anti énzim ti HA alam.4-6
Sajauh ieu, agén crosslinking kimiawi dipaké pikeun ngahasilkeun crosslinked HA ngawengku metacrylamide, 7 hydrazide, 8 carbodiimide, 9 divinyl sulfone, 1,4-butanediol diglycidyl éter (BDDE) Jeung poli(étilena glikol) diglycidyl éter.10,11 BDDE ayeuna agén crosslinking anu paling sering dianggo.Sanajan jenis hidrogél ieu geus kabuktian aman salila sababaraha dekade, agén crosslinking nu dipaké nyaéta réagen réaktif nu bisa jadi sitotoksik jeung, dina sababaraha kasus, mutagenic.12 Ku alatan éta, eusi sésa maranéhanana dina hidrogél ahir kudu luhur.BDDE dianggap aman lamun konsentrasi residual kirang ti 2 bagian per juta (ppm).4
Aya sababaraha metode pikeun ngadeteksi konsentrasi BDDE résidu rendah, gelar cross-linking sareng posisi substitusi dina hidrogél HA, sapertos kromatografi gas, kromatografi pangaluaran ukuran gandeng sareng spéktrométri massa (MS), metode pangukuran fluoresensi résonansi magnetik nuklir (NMR), sareng Asép Sunandar Sunarya dioda gandeng kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC).13-17 Ulikan ieu ngajéntrékeun deteksi sareng karakterisasi produk sampingan dina hidrogél HA anu dipatalikeun silang ahir anu dihasilkeun ku réaksi BDDE sareng HA dina kaayaan basa.HPLC sareng kromatografi cair-spéktrométri massa (analisis LC-MS).Kusabab karacunan produk sampingan ieu tina BDDE henteu dipikanyaho, kami nyarankeun yén kuantifikasi résiduna kedah ditangtukeun dina cara anu sami sareng metode anu biasana dilakukeun dina BDDE dina produk ahir.
Garam natrium HA (Shiseido Co., Ltd., Tokyo, Jepang) ngabogaan beurat molekular ~1.368.000 Da (metode Laurent) 18 jeung viskositas intrinsik 2,20 m3/kg.Pikeun réaksi crosslinking, BDDE (≥95%) dibeuli ti Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, AS).Saline buffered fosfat kalayan pH 7,4 dibeuli ti Sigma-Aldrich Company.Kabéh pangleyur, asetonitril jeung cai dipaké dina analisis LC-MS dibeuli ti kualitas kelas HPLC.Asam format (98%) dibeuli salaku kelas réagen.
Kabéh percobaan anu dipigawé dina sistem UPLC Acquity (Waters, Milford, MA, AS) tur disambungkeun ka API 3000 triple quadrupole spéktrométer massa dilengkepan sumber ionisasi electrospray (AB SCIEX, Framingham, MA, AS).
Sintésis cross-linked HA hydrogels dimimitian ku nambahkeun 198 mg BDDE kana 10% (w/w) natrium hyaluronate (NaHA) solusi ku ayana 1% alkali (natrium hidroksida, NaOH).Konsentrasi BDDE ahir dina campuran réaksi éta 9,9 mg/mL (0,049 mM).Lajeng, campuran réaksi ieu tuntas dicampurkeun jeung homogenized sarta diwenangkeun pikeun lumangsungna dina 45 ° C salila 4 jam.19 pH réaksina dijaga dina ~12.
Saatos éta, campuran réaksi dikumbah ku cai, sareng hidrogél HA-BDDE ahir disaring sareng éncér sareng panyangga PBS pikeun ngahontal konsentrasi HA 10 dugi ka 25 mg / mL, sareng pH akhirna 7,4.Pikeun sterilisasi hidrogél HA anu dipatalikeun silang, sadaya hidrogél ieu diautoklaf (120°C salami 20 menit).Hidrogél BDDE-HA anu dimurnikeun disimpen dina suhu 4 ° C dugi ka analisa.
Pikeun nganalisis BDDE hadir dina produk HA cross-linked, sampel 240 mg ieu ditimbang sarta diwanohkeun kana liang tengah (Microcon®; Merck Millipore, Billerica, MA, AS; volume 0.5 ml) jeung centrifuged dina 10.000 rpm dina suhu kamar. 10 menit.Jumlahna aya 20 µL cairan pull-down dikumpulkeun sareng dianalisis.
Pikeun nganalisis standar BDDE (Sigma-Aldrich Co) dina kaayaan basa (1%, 0.1% sareng 0.01% NaOH), upami kaayaan di handap ieu kapendak, sampel cair 1:10, 1:100, atanapi dugi ka 1: 1.000.000 Upami diperlukeun, make MilliQ cai deionized pikeun analisis.
Pikeun bahan awal dipaké dina réaksi cross-linking (HA 2%, H2O, 1% NaOH, jeung 0,049 mM BDDE), 1 ml unggal sampel disiapkeun tina bahan ieu dianalisis ngagunakeun kaayaan analisis sarua.
Pikeun nangtukeun spésifisitas puncak anu muncul dina peta ion, 10 µL larutan standar 100 ppb BDDE (Sigma-Aldrich Co) ditambahkeun kana sampel 20 µL.Dina hal ieu, konsentrasi ahir standar dina unggal sampel nyaéta 37 ppb.
Mimiti, nyiapkeun solusi stok BDDE kalayan konsentrasi 11.000 mg / L (11.000 ppm) ku cara éncér 10 μL BDDE standar (Sigma-Aldrich Co) sareng 990 μL cai MilliQ (dénsitas 1,1 g / mL).Anggo solusi ieu kanggo nyiapkeun larutan BDDE 110 µg/L (110 ppb) salaku éncér standar perantara.Teras, paké éncér standar BDDE perantara (110 ppb) pikeun nyiapkeun kurva standar ku cara éncér éncér perantara sababaraha kali pikeun ngahontal konsentrasi anu dipikahoyong 75, 50, 25, 10, sareng 1 ppb.Ditémbongkeun saperti dina Gambar 1, kapanggih yén kurva baku BDDE ti 1,1 nepi ka 110 ppb boga linearity alus (R2> 0,99).Kurva standar diulang dina opat percobaan mandiri.
Gambar 1 BDDE kurva calibration baku diala ku analisis LC-MS, nu korelasi alus dititénan (R2> 0,99).
Singgetan: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl éter;LC-MS, kromatografi cair sareng spéktrometri massa.
Pikeun ngaidentipikasi sareng ngitung standar BDDE anu aya dina cross-link HA sareng standar BDDE dina solusi dasar, analisis LC-MS dianggo.
Pemisahan kromatografi dihontal dina kolom LUNA 2.5 µm C18(2)-HST (50×2.0 mm2; Phenomenex, Torrance, CA, USA) sareng disimpen dina suhu kamar (25°C) salami analisa.Fase gerak diwangun ku asetonitril (pangleyur A) jeung cai (pangleyur B) nu ngandung 0,1% asam format.Fase gerak diélusi ku élusi gradién.Gradién nyaéta kieu: 0 menit, 2% A;1 menit, 2% A;6 menit, 98% A;7 menit, 98% A;7,1 menit, 2% A;10 menit , 2% A. Waktu jalanna 10 menit sareng volume suntikan 20 µL.Waktu ingetan BDDE sakitar 3,48 menit (mulai ti 3,43 dugi ka 4,14 menit dumasar kana ékspérimén).Fase mobile dipompa dina laju aliran 0,25 mL / mnt pikeun analisis LC-MS.
Pikeun analisis BDDE jeung kuantifikasi ku MS, sistem UPLC (Waters) digabungkeun jeung API 3000 triple quadrupole spéktrométer massa (AB SCIEX) dilengkepan sumber ionisasi electrospray, sarta analisis dipigawé dina mode ion positif (ESI +).
Numutkeun analisis sempalan ion dipigawé dina BDDE, sempalan jeung inténsitas pangluhurna ditangtukeun jadi sempalan pakait jeung 129.1 Da (Gambar 6).Ku alatan éta, dina mode ngawaskeun multi-ion (MIM) pikeun kuantifikasi, konvérsi massa (rasio massa-to-muatan [m / z]) tina BDDE nyaéta 203,3 / 129,1 Da.Éta ogé ngagunakeun mode scan pinuh (FS) sareng mode scan ion produk (PIS) pikeun analisis LC-MS.
Pikeun pariksa spésifisitas métode, sampel kosong (fase mobile awal) dianalisis.Henteu aya sinyal anu dideteksi dina sampel kosong kalayan konvérsi massa 203,3 / 129,1 Da.Ngeunaan kaulangan percobaan, 10 injections baku 55 ppb (di tengah kurva calibration) dianalisis, hasilna simpangan baku residual (RSD) <5% (data teu ditémbongkeun).
Eusi BDDE sésa-sésa diitung dina dalapan hidrogél HA cross-linked BDDE autoclaved béda, pakait jeung opat percobaan bebas.Sakumaha anu dijelaskeun dina bagian "Bahan sareng Métode", kuantifikasi dievaluasi ku nilai rata-rata kurva régrési éncér standar BDDE, anu pakait sareng puncak unik anu dideteksi dina transisi massa BDDE 203.3 / 129.1 Da, kalayan ingetan. waktos 3.43 ka 4.14 menit Teu ngantosan.Gambar 2 nembongkeun conto kromatogram standar rujukan 10 ppb BDDE.Méja 1 nyimpulkeun eusi BDDE sésa dalapan hidrogén béda.rentang nilai nyaeta 1 nepi ka 2,46 ppb.Ku alatan éta, konsentrasi BDDE residual dina sampel bisa ditarima pikeun pamakéan manusa (<2 ppm).
angka 2 kromatogram ion tina 10 ppb BDDE baku rujukan (Sigma-Aldrich Co), MS (m / z) transisi diala ku analisis LC-MS 203,30 / 129,10 Da (dina modeu MRM positif).
Singgetan: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl éter;LC-MS, kromatografi cair sareng spéktrometri massa;MRM, ngawas réaksi sababaraha;MS, beurat;m/z, babandingan massa-to-muatan.
Catetan: Sampel 1-8 mangrupikeun hidrogél HA anu kaitkeun silang BDDE anu autoklaf.Jumlah sésa BDDE dina hidrogel sareng puncak waktos ingetan BDDE ogé dilaporkeun.Tungtungna, ayana puncak anyar kalawan waktu ingetan béda ogé dilaporkeun.
Singgetan: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl éter;HA, asam hyaluronic;MRM, ngawas réaksi sababaraha;tR, waktos ingetan;LC-MS, kromatografi cair sareng spéktrometri massa;RRT, waktos ingetan relatif.
Ahéng, analisis kromatogram ion LC-MS némbongkeun yén dumasar kana sakabéh autoclaved cross-numbu sampel hidrogel HA dianalisis, aya hiji puncak tambahan dina waktu ingetan pondok tina 2,73 nepi ka 3,29 menit.Contona, Gambar 3 nembongkeun kromatogram ion tina sampel HA cross-numbu, dimana puncak tambahan muncul dina waktu ingetan béda ngeunaan 2,71 menit.Waktu ingetan relatif observasi (RRT) antara puncak karek observasi jeung puncak ti BDDE kapanggih janten 0.79 (Table 1).Kusabab urang terang yén puncak karek katalungtik kirang dipikagaduh dina kolom C18 dipaké dina analisis LC-MS, puncak anyar bisa pakait jeung sanyawa leuwih polar ti BDDE.
Gambar 3 Ion kromatogram tina cross-numbu sampel hidrogel HA diala ku LC-MS (konversi massa MRM 203.3/129.0 Da).
Singgetan: HA, asam hyaluronic;LC-MS, kromatografi cair sareng spéktrometri massa;MRM, ngawas réaksi sababaraha;RRT, waktos ingetan relatif;tR, waktos ingetan.
Pikeun ngaleungitkeun kamungkinan yén puncak anyar anu dititénan tiasa janten kontaminasi anu asalna dina bahan baku anu dianggo, bahan baku ieu ogé dianalisis nganggo metode analisis LC-MS anu sami.Bahan awal anu dianalisis kalebet cai, 2% NaHA dina cai, 1% NaOH dina cai, sareng BDDE dina konsentrasi anu sami dianggo dina réaksi cross-linking.Kromatogram ion tina bahan awal anu dianggo henteu nunjukkeun sanyawa atanapi puncak, sareng waktos ingetanana saluyu sareng puncak énggal anu dititénan.Kanyataan ieu ngaleungitkeun pamanggih yén henteu ngan ukur bahan awal tiasa ngandung sanyawa atanapi zat anu tiasa ngaganggu prosedur analisa, tapi henteu aya tanda kamungkinan kontaminasi silang sareng produk laboratorium sanés.Nilai konsentrasi anu dicandak saatos analisa LC-MS BDDE sareng puncak énggal dipidangkeun dina Tabel 2 (sampel 1-4) sareng kromatogram ion dina Gambar 4.
Catetan: Sampel 1-4 pakait jeung bahan baku dipaké pikeun ngahasilkeun autoclaved BDDE cross-numbu hidrogél HA.Sampel ieu henteu diautoklaf.
Singgetan: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl éter;HA, asam hyaluronic;LC-MS, kromatografi cair sareng spéktrometri massa;MRM, ngawaskeun sababaraha réaksi.
Gambar 4 pakait jeung kromatogram LC-MS tina sampel bahan baku dipaké dina réaksi cross-linking HA jeung BDDE.
Catetan: Sadaya ieu diukur dina konsentrasi sareng rasio anu sami anu dianggo pikeun ngalaksanakeun réaksi beungkeut silang.Jumlah bahan baku anu dianalisis ku kromatogram pakait sareng: (1) cai, (2) larutan cai 2% HA, (3) larutan cai NaOH 1%.Analisis LC-MS dipigawé pikeun konversi massa 203,30 / 129,10 Da (dina modeu MRM positif).
Singgetan: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl éter;HA, asam hyaluronic;LC-MS, kromatografi cair sareng spéktrometri massa;MRM, ngawaskeun sababaraha réaksi.
Kaayaan anu nyababkeun kabentukna puncak anyar ditaliti.Dina raraga diajar kumaha kaayaan réaksi dipaké pikeun ngahasilkeun cross-linked HA hydrogel mangaruhan réaktivitas agén cross-linking BDDE, ngarah kana formasi puncak anyar (mungkin ku-produk), ukuran béda dipigawé.Dina determinations ieu, urang diulik jeung dianalisis crosslinker BDDE final, nu dirawat kalayan konsentrasi béda NaOH (0%, 1%, 0.1%, jeung 0.01%) dina medium cai, dituturkeun ku atawa tanpa autoclaving.Prosedur baktéri pikeun simulasi kaayaan anu sami sami sareng metode anu dianggo pikeun ngahasilkeun hidrogél HA anu dikaitkeun silang.Sakumaha anu dijelaskeun dina bagian "Bahan sareng Métode", transisi massa sampel dianalisis ku LC-MS ka 203.30 / 129.10 Da.BDDE jeung konsentrasi puncak anyar diitung, sarta hasilna ditémbongkeun dina Table 3. Taya puncak anyar anu kauninga dina sampel nu teu autoclaved, paduli ayana NaOH dina leyuran (sampel 1-4, Table). 3).Pikeun sampel autoclaved, puncak anyar ngan dideteksi ku ayana NaOH dina leyuran, sarta formasi puncak sigana gumantung kana konsentrasi NaOH dina leyuran (sampel 5-8, Table 3) (RRT = 0,79).Gambar 5 nembongkeun conto hiji kromatogram ion, némbongkeun dua sampel autoclaved dina ayana atawa henteuna NAOH.
Singgetan: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl éter;LC-MS, kromatografi cair sareng spéktrometri massa;MRM, ngawaskeun sababaraha réaksi.
Catetan: Kromatogram luhur: Sampel dirawat kalayan larutan cai 0,1% NaOH sareng diautoklaf (120 ° C salami 20 menit).Kromatogram handap: Sampel henteu dirawat kalayan NaOH, tapi diautoklaf dina kaayaan anu sami.Konversi massa 203.30 / 129.10 Da (dina modeu MRM positif) dianalisis ku LC-MS.
Singgetan: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl éter;LC-MS, kromatografi cair sareng spéktrometri massa;MRM, ngawaskeun sababaraha réaksi.
Dina sakabéh sampel autoclaved, kalawan atawa tanpa NaOH, konsentrasi BDDE ieu greatly ngurangan (nepi ka 16,6 kali) (sampel 5-8, Table 2).Turunna konsentrasi BDDE bisa jadi alatan kanyataan yén dina suhu luhur, cai bisa meta salaku basa (nukleofil) pikeun muka cingcin époksida BDDE pikeun ngabentuk sanyawa 1,2-diol.Kualitas monoisotop sanyawa ieu béda ti BDDE sahingga moal kapangaruhan.LC-MS kauninga shift massa 203,30 / 129,10 Da.
Tungtungna, percobaan ieu némbongkeun yén generasi puncak anyar gumantung kana ayana BDDE, NAOH, sarta prosés autoclaving, tapi teu boga hubungan jeung HA.
Puncak anyar kapanggih dina waktu ingetan kira 2.71 menit ieu lajeng dicirikeun ku LC-MS.Pikeun tujuan ieu, BDDE (9.9 mg / mL) diinkubasi dina larutan cai 1% NaOH sareng diautoklaf.Dina Tabel 4, karakteristik puncak anyar dibandingkeun sareng puncak rujukan BDDE anu dipikanyaho (waktos ingetan kirang langkung 3,47 menit).Dumasar kana analisis fragméntasi ion tina dua puncak, bisa dicindekkeun yén puncak kalawan waktu ingetan 2,72 menit nembongkeun fragmen sarua jeung puncak BDDE, tapi kalawan inténsitas béda (Gambar 6).Pikeun puncak pakait jeung waktu ingetan (PIS) 2.72 menit, puncak leuwih sengit dititénan sanggeus fragméntasi dina massa 147 Da.Dina konsentrasi BDDE (9.9 mg / mL) dipaké dina tekad ieu, modus absorbance béda (UV, λ = 200 nm) dina spéktrum ultraviolét ogé katalungtik sanggeus separation kromatografi (Gambar 7).Puncak kalayan waktos ingetan 2,71 menit masih katingali dina 200 nm, sedengkeun puncak BDDE teu tiasa dititénan dina kromatogram dina kaayaan anu sami.
Tabél 4 Hasil karakterisasi puncak anyar kalawan waktu ingetan kira-kira 2,71 menit jeung puncak BDDE kalawan waktu ingetan 3,47 menit.
Catetan: Pikeun kéngingkeun hasil ieu, LC-MS sareng HPLC nganalisa (MRM sareng PIS) dilakukeun dina dua puncak.Pikeun analisis HPLC, deteksi UV kalayan panjang gelombang 200 nm dianggo.
Singgetan: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl éter;HPLC, kromatografi cair kinerja luhur;LC-MS, kromatografi cair sareng spéktrometri massa;MRM, ngawas réaksi sababaraha;m/z, babandingan massa-to-muatan;PIS, scanning Ion produk;sinar ultraviolét, sinar ultraviolét.
Catetan: Sempalan massa dicandak ku analisis LC-MS (PIS).Kromatogram luhur: spéktrum massa fragmén sampel baku BDDE.Kromatogram handap: Spéktrum massa puncak anyar dideteksi (RRT pakait sareng puncak BDDE nyaéta 0.79).BDDE diolah dina larutan NaOH 1% sareng diautoklaf.
Singgetan: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl éter;LC-MS, kromatografi cair sareng spéktrometri massa;MRM, ngawas réaksi sababaraha;PIS, scan ion produk;RRT, waktos ingetan relatif.
Gambar 7 Kromatogram ion ion prékursor 203.30 Da, sareng (A) puncak énggal kalayan waktos ingetan 2.71 menit sareng (B) deteksi UV tina puncak standar rujukan BDDE dina menit 3.46 dina 200 nm.
Dina sakabéh cross-linked HA hydrogels dihasilkeun, éta katalungtik yén sésa konsentrasi BDDE sanggeus kuantifikasi LC-MS éta <2 ppm, tapi puncak kanyahoan anyar muncul dina analisis.Puncak anyar ieu henteu cocog sareng produk standar BDDE.Produk standar BDDE ogé parantos ngalaman konversi kualitas anu sami (konversi MRM 203.30 / 129.10 Da) analisis dina modeu MRM positif.Sacara umum, métode analitik séjén kayaning kromatografi dipaké salaku tés wates pikeun ngadeteksi BDDE dina hidrogél, tapi wates deteksi maksimum (LOD) rada handap ti 2 ppm.Di sisi séjén, sajauh ieu, NMR jeung MS geus dipaké pikeun characterize darajat cross-linking jeung / atawa modifikasi HA dina fragmen Unit gula produk HA cross-numbu.Tujuan tina téknik ieu henteu acan kantos ngitung deteksi BDDE sésa-sésa dina konsentrasi anu handap sapertos anu dijelaskeun dina tulisan ieu (LOD metode LC-MS kami = 10 ppb).
waktos pos: Sep-01-2021